第4课时 实验：生物组织中可溶性

还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

知识精华

一、可溶性还原糖的鉴定原理：

　　生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基，因此叫还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基，因此叫非还原性糖，不具有还原性。实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。

　　可溶性还原糖与斐林试剂（质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成）混合后,可以生成砖红色沉淀。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色 棕色 砖红色

二、脂肪的鉴定原理：

　　鉴定生物组织中是否含有脂肪时，可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ，苏丹Ⅲ染液遇脂肪的染色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的染色反应为红色。

三、蛋白质的鉴定原理：

　　鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。在碱性溶液NaOH中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+ 作用，形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。

题例领悟

例1：用斐林试剂鉴定可溶还原糖时，溶液的颜色变化过程为：

A、浅蓝色 棕色 砖红色 B、无色 浅蓝色 棕色

C、砖红色 浅蓝色 棕色 D、棕色 绿色 无色

　　解析：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后，立即生成浅蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，答案为A

例2：将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是：

A、碘液、苏丹Ⅲ溶液 B、双缩脲试剂、碘液

C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液 D、碘液 、斐林试剂

解析：白浆为淀粉，淀粉遇碘变蓝，黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。因此，答案为B

自我评价

一、选择题：

1、徒手切片时的刀口方向应是 （ ）

A、向前 B、向内 C、向左 D、向右

2、在鉴定蛋白质样品时，加双缩脲试剂的正确操作方法是 （ ）

A、先加A液，混合后再加B液 B、先加B液，混合后再加A液

C、A、B液混合后立即加入 D、上述方法都可以采用

3、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是 （ ）