第14课时　多聚酶链式反应扩增DNA片段

[学习导航]　1.阅读教材P58"(一)"，分析PCR技术与DNA复制的区别和联系，掌握PCR技术原理。2.阅读教材P59"(二)"，分析PCR的过程，掌握PCR循环的原理。3.阅读教材P62"实验操作"及"操作提示"，掌握PCR技术的实验操作过程及注意事项。4.阅读教材P62～63"结果分析与评价"，掌握DNA含量测定的方法。

[重难点击]　1.了解PCR技术的基本操作。2.理解PCR的原理。3.讨论PCR的应用。

一、PCR原理与反应过程

1.PCR原理与条件

(1)PCR的概念

PCR即多聚酶链式反应，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。

(2)细胞内DNA复制的基本条件

参与的组分 在DNA复制中的作用 解旋酶 打开DNA双链 DNA母链 提供DNA复制的模板 4种脱氧核苷酸 合成子链的原料 DNA聚合酶 催化合成DNA子链 引物 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸

(3)PCR原理

①DNA变性：在80～100 ℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。

②DNA复性：当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链，这个过程称为复性。

③子链的合成：DNA聚合酶从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。

(4)PCR条件

①原料：4种脱氧核苷酸。

②模板：加热变性解旋后的两条DNA母链。