生物:5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》学案(1)(新人教版选修1)
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课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段

学习目标:

  1、了解PCR技术的基本操作

  2、理解PCR的原理

  3、讨论PCR的应用

重点:PCR的原理和PCR的基本操作

难点:PCR的原理

Ⅰ.基础知识

PCR技术扩增DNA的过程,与细胞内DNA复制过程类似:

1.细胞内DNA复制条件分析:

条件 组分 作用 模板 DNA的两条单链 提供复制的模板 原料 四种脱氧核苷酸 合成DNA子链的原料 酶 解旋酶

DNA聚合酶 打开DNA双螺旋

催化合成DNA子链 能量 ATP 为解螺旋和合成子链供能 引物 RNA 为DNA聚合酶提供合成的3'端起点 2.细胞内DNA复制过程的解析:

解 旋:解旋酶、ATP,DNA两条链打开,形成两条DNA单链。

引物结合:在DNA单链3'端与DNA反向配对结合。

DNA聚合酶结合:DNA聚合酶与模板链结合,标志着单链合成开始。

子链合成:DNA聚合酶从引物3'端开始,将配对的脱氧核苷酸连接起来。

后续加工:DNA聚合酶I将引物切去,并合成空缺处的DNA单链,再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来(半不连续合成。先导链,滞后链)

子链合成特点: 。

[思考]DNA分子能准确复制的原因有哪些?

3. DNA分子复制的人工控制

解开螺旋:在 ℃时,DNA双螺旋打开,形成两条DNA单链,称为变性。