（5）特点：指数形式扩增

(二) 制备重组DNA分子（基因表达载体的构建）

1、重组DNA分子的组成：除了目的基因外，还必须有标记基因。

★标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

2、方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。

(三) 转化受体细胞（将目的基因导入受体细胞）

1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

2、常用的转化方法：

（1）将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌介导转化技术（农杆菌转化法），其次还

基因枪介导转化技术（基因枪法）和花粉管通道技术（花粉管通道法）。

（2）将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。

（3）将目的基因导入微生物细胞：Ca2＋处理法。

例2、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。

（1）获得目的基因的方法通常包括 和 。

（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是 和 。

（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或 ，后者的形状成 。

（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 ，所以在转化后通常需要进行 操作。

（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和 序列上是相同的。

(四) 筛选出获得目的基因的受体细胞、培养受体细胞并诱导目的基因的表达（目的基因的检测与鉴定）

1、分子水平的检测

（1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。

（2）其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用RNA分子杂交技术。

（3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原-抗体杂交技术。

提示：①DNA分子杂交技术首先提取受体细胞中的DNA，然后高温解成单链，再与同位素标