中去。（5）大小应合适，太大则不易操作。

　　4.比较DNA连接酶和DNA聚合酶

　　相同点：两者都形成磷酸二酯键（在相邻核苷酸的3位碳原子上的羟基与5位碳原子上所连磷酸基团的羟基之间形成）；都由蛋白质构成。

　　不同点：①DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。②DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上（不能连接单链DNA）的两个缺口同时连接起来，因此DNA连接酶不需要模板。

活学巧用

【例1】 下列关于基因工程的叙述，正确的是(　　)

A.基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因

B.细菌质粒是基因工程常用的运载体

C.通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理载体DNA

D.为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体

解题提示：细菌质粒是基因工程中常用的载体。A项中抗生素抗性基因应为标记基因，而不是目的基因。C选项应该用同一种限制酶，以保证同样的末端。D选项在选择受体细胞时，主要考虑的是该细胞中目的基因是否表达，由于受精卵全能性最高，所以往往成为对动植物实施转基因的首选；但也可以导入其他细胞，如植物胚的细胞、动物囊胚早期细胞。

答案：B

【例2】 下列关于限制酶的说法正确的是(　　)

A.限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布

B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

C.不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端

D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键

解题提示：此题主要考查限制酶的有关知识。限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，并不是广泛存在于各种生物中；一种限制酶能识别双链DNA的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开；DNA分子经限制酶切割会形成黏性末端和平末端两种。

答案：B