(1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物和__________酶等。完成过程①②③的目的是________________________________________________________________________。
(2)过程③和⑤中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使________键断开,形成的黏性末端是__________。
(3)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测__________。
解析:(1)过程①是以mRNA为模板通过逆转录过程合成cDNA,所以需要加入缓冲液、引物、dNTP和逆转录酶等。完成过程①②③的目的是获取目的基因(ETA基因)。(2)过程③和⑤中,利用限制酶XhoⅠ切割DNA以获取目的基因,限制酶XhoⅠ切割使DNA的磷酸二酯键断开,形成的黏性末端是。(3)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测ETA基因能否表达及表达量。
答案:(1)反转录(逆转录) 获取目的基因ETA基因
(2)磷酸二酯 (3)ETA基因能否表达及表达量
[课时作业]
一、选择题
1.下列关于限制酶和DNA连接酶的理解,正确的是( )
A.其化学本质都是蛋白质
B.DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键
C.它们不能被反复使用
D.在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶
解析:选A。限制酶与DNA连接酶的化学本质都是蛋白质,A正确;DNA连接酶连接的是两个DNA片段间相邻两个核苷酸间的磷酸二酯键,B错误;酶在化学反应前后其数量、性质、功能均不发生改变,因此可以反复利用,C错误;DNA聚合酶只能连接单个核苷酸,不能催化两个DNA片段连接,不能替代DNA连接酶,D错误。