12．在PCR扩增DNA的实验中，预计一个DNA分子经过30次循环后，应该得到230个DNA分子，但是结果只有约210个DNA分子，那么出现该现象的原因不可能是 (　　)

　　A．Taq DNA聚合酶的活力不够，或活性受到抑制

　　B．系统设计欠妥

　　C．循环次数不够

　　D．引物不能与亲链结合

13．PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链做模板时将 (　　)

　　A．仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸

　　B．无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链

　　C．同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链延伸

　　D．与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸

14．近20年来，PCR(多聚酶链式反应)技术成为分子生物学实验室的一种常规实验手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在短时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，从而使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链间的______________键完全打开，称为____________；而在细胞中是在____________酶的作用下进行的。

(2)如果只需要大量克隆模板DNA中间的某个特定区段，应该加入________种特定的引物。当温度降低至40 ℃时，引物与两条"舒展"的模板的特定位置结合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的________端连接脱氧核苷酸，两条子链的延伸方向都是________________________________________________________________________。

(3)PCR技术的必需条件，除了模板、原料、酶之外，至少还有三个条件，即液体环境、适宜的________和________，前者由________自动调控，后者则靠________来维持。

(4)通过PCR技术使DNA分子大量复制，如果将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制四次之后，则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例是________。

15．PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种Taq DNA聚合酶。

　　请回答有关问题：

(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应