(2)镜检方法：最常用的方法是醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。

　　2．材料的消毒

　　(1)将花蕾放入体积分数为70%的酒精中浸泡约30 s，立即取出，在无菌水中冲洗，后用无菌吸水纸吸干。

　　(2)放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4 min，再用无菌水冲洗3～5次。

　　3．接种

　　(1)剥离花药时，尽量不损伤花药，彻底去除花丝。

　　(2)每瓶接种花药7～10个。

　　4．培养

　　(1)温度：25_℃左右。

　　(2)光照：开始不需要光照，幼小植株形成后才需要光照。

　　(3)转移：将愈伤组织及时转移到分化培养基上；如果释放出胚状体，尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上。

　　5．鉴定和筛选：鉴定染色体倍性的变化，并进行筛选。

　　1．花粉鉴定的两种方法

　　(1)最常用的方法--醋酸洋红法：花药(载玻片上)→质量分数为1%的醋酸洋红→用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检(花粉细胞核染成红色)。

　　(2)某些植物的花粉细胞核不易着色，采用焙花青-铬矾法：花药(在卡诺氏固定液中固定20 min)→取出，置于载玻片上→焙花青-铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检(花粉细胞核染成蓝黑色)。

　　2．植物组织培养与花药培养的比较

项目 组织培养 花药培养 理论依据 植物细胞的全能性 基本过程 脱分化→再分化 影响因素 选材、营养、激素、pH、温度、光照等 材料选取 一般选择未开花植株茎上部新萌生的侧枝(体细胞) 通常选择完全未开放的花蕾(花粉粒) 外植体类型 体细胞 生殖细胞 光照状况 每日用日光灯照射12 h 开始不需要光照，幼小植株形成后需要光照 操作流程 制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种→培养→筛选→移栽→栽培