(1)取材：取动物的胚胎或幼龄动物的组织或器官剪碎，加入适量胰蛋白酶或胶原纤维酶使细胞分散。

(2)原代培养：经过滤、离心后将动物细胞接种到无菌的培养液中，在适宜的条件下进行静止或慢速转动培养，称为原代培养。

①贴壁生长：悬液的细胞贴附在培养瓶的表面，开始有丝分裂，其数目以指数增长的方式增多。

②接触抑制：贴壁细胞分裂铺满培养瓶的整个表面，细胞相互接触时，细胞分裂停止。

(3)传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖，即为传代培养。

①细胞生长到10代左右时，出现生长停滞，大部分细胞衰老死亡。

②极少部分细胞可以传到40～50代，遗传物质没有(填"有"或"没有")发生改变。

③有些细胞(如肿瘤细胞)遗传物质发生了改变，可以无限制的传代下去。

结合动物细胞培养的过程分析下列问题：

1．为什么要取动物的胚胎或幼龄动物的组织或器官细胞进行细胞培养？

答案　这类细胞具有较强的分裂能力，容易培养。

2．培养过程中两次使用胰蛋白酶，目的有何不同？

答案　第一次是将组织分散成单个细胞，第二次是将贴满瓶壁的细胞分散成单个细胞。

3．能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？

答案　胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。

4．动物细胞培养为什么需要无菌、无毒的环境？