（四）叶绿体色素的提取和分离

1.实验原理解读

（1）提取：叶绿体中含有叶绿素和类胡萝卜素，这两类色素都溶于有机溶剂，所以可

以用丙酮等有机溶剂提取

（2）分离：色素在纸层析液中的溶解度不同，它们随层析液在滤纸条上的扩散速度也

不同，从而将色素分离。

2.实验流程图示

色素提取：取菠菜叶5g，洗净，去叶脉剪碎，放入研钵，加入少量石英砂和碳酸钙，再↓ 加入2mL丙酮，快速研磨

制备滤液：将研磨液用小漏斗过滤到试管中，避光保存

　　　↓

制备滤纸条：制作宽1cm、长10cm的滤纸条，干燥处理。在距离一端1cm处用铅笔画线，

↓ 并将两角剪去

画滤液细线：用毛细吸管吸取滤液，沿铅笔细线画出滤液细线，分干后，重复多次。

↓

色素层析：向烧杯中加入层析液，将滤纸带有色素的一端插入烧杯，但不能让色素带没

↓ 入层析液中，观察到层析液快到达滤纸边缘时，停止层析

观察结果并分析：滤纸条出现的四条色素带由上到下依次是：橙黄色的胡萝卜素、黄色

的叶黄素、蓝绿色的叶绿素a、黄绿色的叶绿素b

实验疑难点拨

（1）下列试剂的作用

石英砂 使研磨充分

碳酸钙 保护叶绿素

丙酮 溶解（提取）色素

　　　　　层析液 分离色素

（2）实验取材时应注意材料的颜色：颜色浓绿最好，若没有菠菜，可用韭菜代替。丙

酮也可用酒精代替。石英砂也可用用二氧化硅代替。

（3）出现四条色素带的直接原因是四种色素的扩散速度不同，根本原因是四种色素的

溶解度不同

（4）将滤纸条的两角剪去的原因：不剪去两角，两角的层析液层析速度快，使分离出

的色素带不整齐。

（5）滤液细线为何画多次，为何风干后才能再画：多画的目的是为了增加色素的量；

风干后再画，可以避免画的滤液细线过粗。因为滤液细线过粗，会出现不同色素带

前后重叠、界线不清的问题。

（6）层析时注意层析液不能没过滤液细线，否则色素溶解于层析液中，无法得到实验

结果

（7）结果分析

①滤纸条上出现4个色素带，从离起点有远到近看依次是：胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b

②色素带间距最大的 是胡萝卜素和叶黄素，最小的是叶绿素a和叶绿素b

③最宽的是叶绿素a，最窄的是胡萝卜素。

（五）光合作用的过程

（1）光合作用的全过程，根据是否需光可分为 光反应 和 暗反应 两个阶段。其中 光反应阶段必须在光下才能进行，反应场所是在 类囊体膜上。 暗反应 阶段 不需光，反应场所是在 叶绿体基质中 。

（2）光反应和暗反应的区别和联系