第2课时　分离特定的微生物并测定其数量

[学习导航]　1.认识各种微生物形成的菌落特征。2.学会利用涂布平板法分离、培养微生物，并能测定其数量。3.掌握利用选择培养基分离特定微生物的方法。

[重难点击]　简述分离、培养微生物的方法及数量测定。

一、微生物分离和培养的基本理论

1．纯培养物培养

在实验室中利用选择培养基可以筛选和分离某种微生物，然后在高度稀释的条件下，在固体培养基上培养该微生物形成单个菌落，即由一个微生物(如某种细菌)形成的单个菌落。单个菌落即为纯培养物，可用于科学研究。

2．分离特定的微生物

(1)平板分离法

①概念：能将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面，每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成单个菌落。

②分离、培养微生物最常用的培养基是琼脂固体培养基。

③类型：平板分离法有多种，如涂布平板法、混合平板法等。

a．涂布平板法分离细菌：将待分离的样品进行10倍系列稀释，取一定稀释度的样品0.1 mL倒入预先制备好的培养基平板中，用无菌玻璃涂布器将样品涂布均匀，恒温培养一段时间，以获得单个菌落。

b．混合平板法分离细菌：将待分离的样品进行10倍系列稀释，取一定稀释度的样品0.1 mL与熔化冷却至50 ℃左右的培养基混合均匀，将混合液倒入无菌培养皿中制成平板，培养一段时间，以获得单个菌落。

(2)选择培养分离

①概念：科学家针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，使之特别适合这种微生物的生长，而抑制其他微生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。

②依据原理：不同的微生物有不同的营养需求或对某种化学物质有不同的敏感性。

③举例

a．要分离耐高温菌，可在高温条件下进行培养。

b．要分离对某种抗生素具有抗性的菌种，可在加有该抗生素(如链霉素或青霉素)的平板上进行分离。

c．在培养基中加入质量分数为10%的酚，可以抑制细菌和霉菌的生长。