2019-2020学年新苏教版选修1 第四章 第二节 分子生物学技术 学案
2019-2020学年新苏教版选修1 第四章 第二节 分子生物学技术 学案第2页

  的溶液各5 μL,1_μL模板DNA,5_μL引物1和5 μL引物2,29_μL双蒸水。

  (3)煮沸 5_min之后冰浴 2_min,低速离心,按照1单位/μL加入TaqDNA聚合酶。

  (4)扩增DNA片断的反应程序:将微量离心管放入PCR仪中,盖上样品池盖。在 94_℃的条件下预热5 min,再设置反应程序为:94_℃,30_s→55_℃,30_s→72_℃,1_min(以上过程循环30次)。最后一次延伸条件为 72_℃,1_min。

  (5)按照PCR仪器操作要求运行反应程序。

  2.DNA分子的测定

  (1)配制二苯胺试剂:分别配制A液(1.5 g二苯胺溶于100 mL冰醋酸中,再加入1.5 mL浓硫酸,用棕色瓶保存)和B液(体积分数为0.2%的乙醛溶液)。将0.1 mL B液加入10 mL A液中,混匀。

  (2)条件:在沸水浴中加热。

  (3)现象:出现蓝色现象。

  

   判一判

  (1)DNA扩增的变性过程中需要DNA解旋酶的参与。(×)

  (2)DNA扩增退火过程中需要DNA聚合酶的参与。(×)

  (3)DNA延伸过程需要TaqDNA聚合酶的作用。(√)

  (4)所有PCR中使用的引物都是相同的。(×)

   连一连