2018-2019学年 人教版选修3 基因工程的基本操作程序 教案
2018-2019学年 人教版选修3 基因工程的基本操作程序 教案第3页

  片段的核酸合成技术。

PCR的原理:

  利用DNA双链复制的原理,将基因的核苷酸序列不断加以复制,使其数量呈指数方式增长。

PCR技术的过程:

* 变性:目的基因DNA加热至90-950C变性形成单链DNA;

* 退火:温度降低至55-600C引物与互补DNA链结合;

* 延伸:适当升温至70-750C,在DNA聚合酶作用下从引物起始进行互补链的合成。

条件:

  已知目的基因的核苷酸序列(前提条件)

  热稳定的DNA聚合酶(Tap)

  四种脱氧核苷酸

  引物

③通过DNA合成仪直接合成目的基因

  

  当基因比较小、蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时,可采用此种方法。

  

2、基因表达载体的构建

1)目的:

  使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。

2)基因表达载体的组成:

* 目的基因

启动子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因,转录出mRNA最终获得所需要的蛋白质。