提示：此细菌能分解尿素产生氨，氨为碱性，酚红指示剂在碱性下为红色，标志着存在脲酶水解尿素的作用，红色区域大小代表脲酶活性强弱和含量的多少。

　　4．与全营养培养基上的菌落数比较，为什么尿素培养基上只有少数菌落？

　　提示：说明能利用尿素的细菌只占少数。

　　　常用的微生物分离纯化方法

　　稀释涂布平板法

　　(1)液体稀释法：将待分离的样品经过大量稀释后，取稀释液均匀地涂布在培养皿中的培养基表面，培养后就可能得到单个菌落。该法是将已熔化并冷却至约60 ℃(减少冷凝水)的琼脂培养基，先倒入无菌培养皿中，制成无菌平板。待充分冷却凝固后，将一定量(约0.1 mL)的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用玻璃三角刮刀涂布，使菌液均匀分散在整个平板表面，倒置恒温箱中培养。

　　(2)涂布平板法：可省去含菌样品悬液的稀释，直接吸取经振荡分散的样品悬浮液1滴加入1号琼脂平板上，用一支玻璃刮刀均匀涂布，用此涂棒再连续涂布2号、3号、4号平板(连续涂布起逐渐稀释作用，涂布平板数视样品浓度而定)，翻转此刮刀再涂布5号、6号平板，经适温倒置培养后挑取单个菌落。

　　平板划线分离法

　　将已经熔化的培养基倒入培养皿中制成平板，用接种环蘸取少量待分离的菌液，在培养基表面平行或分区划线如下图，然后将培养皿放入恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。几种划线方法如图：

　　　(1)倒平板时，按稀释涂布平板法倒平板，并用记号笔标明培养基名称、编号和实验日期。

　　(2)划线时在近火焰处，左手拿皿底，右手拿接种环，挑取上述的土壤悬液一环在平板上划线。划线的方法很多，但无论采用哪种方法，其目的都是通过划线将样品在平板上进行稀释，使之形成单个菌落。

利用选择培养基进行分离