D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

答案　D

解析　划线之前应对接种环灭菌；划线操作在酒精灯火焰旁进行；从1区域至5区域菌落密度越来越小，因划线所用菌种密度的不同，在3、4、5区域都可能得到所需菌落。

4．(2018·四川雅安中学月考改编)如图所示为实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果。下列相关说法正确的是(　　)

A．该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的

B．在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌

C．该种微生物有可能是H5N1病毒

D．该培养基上的菌落分布不均匀，代表纯化失败

答案　B

解析　题图最可能是用平板划线法进行接种的，A错误；在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌，B正确；病毒不能在培养基上生存繁殖，C错误；平板划线法，随划线次数的增加，菌落密度逐渐减小，因此分布不均匀，D错误。

5．如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，错误的是(　　)

A．该操作步骤是接种，方法是平板划线法

B．除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端

C．图中细菌密度最小的是5处

D．该接种方法适用于细菌的计数

答案　D

解析　题图中所示的纯化方法是平板划线法，该方法要求连续划线多次，直到最后一次划线的末端细菌呈单个存在，所以该方法仅用于纯化大肠杆菌但不适用于细菌的计数。

6．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是(　　)