原理 划线过程中接种环上的菌液逐渐减少，到划线最后部分细菌间距离加大，经培养后能得到单菌落 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落 特点 方法简单，但单菌落较难分开 单菌落更易分开，但操作复杂些 目的 使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体--菌落 　　

　　五、大肠杆菌的培养与分离

　　1．大肠杆菌

　　(1)特性：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。

　　(2)繁殖：以分裂的方式繁殖，分裂速度很快。

　　2．扩大培养与分离

　　扩大培养用LB液体培养基，划线分离用LB固体平面培养基。

　　3．大肠杆菌分离过程

　　(1)培养基灭菌：50 mL LB液体培养基和50 mL LB固体培养基及培养皿使用高压蒸汽灭菌。

　　(2)倒平板：将培养基分别倒入4个灭菌后的培养皿中，水平放置，使之形成平面。

　　(3)接种：在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，在每分钟200转的摇床上振荡培养12 h。

　　(4)划线分离：用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿。培养皿倒置(盖在下面)，放在37 ℃恒温培养箱中培养12～24 h后，可看到在划线的末端出现不连续的单个菌落。

　　(5)培养观察：在无菌操作下将单菌落用接种环取出，再用划线法接种在空白斜面上，在37 ℃下培养24 h后，置于4 ℃冰箱中保存。

　　1．下列操作错误的是(　　)

A．用酒精擦拭双手