课题1 DNA的粗提取与鉴定
学习目标:1.了解DNA的物理、化学性质。(重点) 2.理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。(重点) 3.尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取。(难点)
1.提取DNA的思路及原理
(1)基本思路
①提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
②对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理或化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
(2)实验原理
①分离原理:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离的目的。
②提纯原理:
ⅰDNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则可溶于酒精。
ⅱ蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没有影响。
ⅲ大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温,而DNA在80_℃以上才会变性。
ⅳ洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
③鉴定原理:
DNA+二苯胺\s\up10(沸水浴(沸水浴)蓝色。
2.实验设计
(1)方法步骤