2019-2020学年人教版生物选修一讲义:专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定 Word版含答案
2019-2020学年人教版生物选修一讲义:专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定 Word版含答案第2页

  ①实验材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织。

  ②破碎细胞,获取含DNA的滤液:

  ⅰ动物细胞的破碎--以鸡血为例:在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。

  ⅱ植物细胞的破碎--以洋葱为例:先将洋葱切碎,然后加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分地搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。

  ③去除滤液中的杂质:

方案一 方案二 方案三 利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质 直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10~15 min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质 将滤液放在60~75_℃的恒温水浴箱中保温10~15 min,注意严格控制温度范围   ④DNA的进一步提纯:利用DNA不溶于酒精溶液这一原理,可从溶液中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为白色丝状物。

  ⑤DNA的鉴定:将呈白色丝状物的DNA溶解于5 mL物质的量浓度为2_mol/L的NaCl溶液中,再加入4 mL的二苯胺试剂,沸水中加热5 min,冷却后观察溶液的颜色,注意要同时设置对照实验。

  (2)操作提示

  ①以血液为实验材料时,每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠,防止血液凝固。

  ②加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

  ③鉴定DNA用的染色剂二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。

  

  1.判断对错

  (1)用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L,滤去析出物。 (  )

  (2)将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色。 (  )

  (3)用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同。 (  )

(4)调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,可去除部分杂质。 (  )