第8课时　固定化酶的制备和应用

[学习导航]　1.阅读教材P42内容，了解固定化酶的常用方法。2.结合教材P40～41内容，学习固定化乳糖酶的制备。3.结合教材P42～43内容，检测牛奶中乳糖的分解。

[重难点击]　1.尝试制备固定化乳糖酶。2.利用固定化酶检测乳糖的分解产物。

一、固定化酶及其制备

由于酶的分离与提纯有许多技术性难题，造成酶制剂来源有限、成本高、不利于大规模使用。利用固定化酶技术可以解决这些难题。

1.固定化酶

(1)概念：固定化酶又叫固相化酶，是指固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。酶的固定化过程是通过化学或物理的手段，将酶束缚在一定的区间内，固定酶分子在此区间内进行催化作用。

(2)酶的固定方法：根据酶的性质和载体特性需要采用不同的方法，有时还需要将几种方法联合使用：

①是吸附法：是将酶吸附到载体表面。

②是载体偶联法：是将酶通过共价键结合到载体的表面。

③是交联法：通过把酶交互连接、相互结合从而将酶固定。

④是包埋法：是将酶或者细胞包埋在细微的网格里。

(3)固定化酶技术的优缺点

①优点：稳定性好，而且与底物和产物容易分离。

②缺点：一次只能固定一种酶，不利于催化一系列的反应。

2.固定化乳糖酶的制备

(1)实验原理

①乳糖酶学名为β­D­半乳糖苷水解酶，是工业中应用相当广泛的一种酶，较多地应用于乳制品加工中。很多人小肠黏膜内的乳糖酶活性严重降低，导致乳糖不耐症。用乳糖酶处理部分乳糖，分解为葡萄糖和半乳糖，可以减少这种症状。

②固定乳糖酶用的是凝胶包埋法：凝胶是由丙烯酰胺(Arc)和N，N－甲叉双丙烯酰胺(Bis)形成的三维网状结构的高聚化合物，将酶和凝胶混合，酶即包埋在凝胶内部的微孔中，从而