2018-2019学年高二生物人教版选修一讲义:专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离 Word版含答案
2018-2019学年高二生物人教版选修一讲义:专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离 Word版含答案第5页

  ①目的:经过离心使血红蛋白与其他杂质分离开来,便于下一步对血红蛋白的纯化。

  ②过程

  混合液―→离心管2 000 r/min10 min溶液分层滤纸过滤 除去脂溶性沉淀层―→分液漏斗静置,分出下层的红色透明液体(血红蛋白溶液)

  ③结果(填表)

  

  2.粗分离--透析

  (1)目的:除去样品中相对分子质量较小的杂质或用于更换样品的缓冲液。

  (2)原理:透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。

  (3)操作:1 mL血红蛋白溶液\s\up7(装入(装入)透析袋\s\up7(放入(放入)300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液中(pH为7.0)―→透析12 h。

  3.纯化--凝胶色谱操作

  (1)凝胶色谱柱的制作

  ①取长40 cm,内径为1.6 cm的玻璃管,两端用砂纸磨平。

  ②柱底部制作:橡皮塞打孔→挖出凹穴→安装移液管头部→覆盖尼龙网,再用100目的尼龙纱将橡皮塞上部包好。

  ③柱顶部制作:橡皮塞打孔→安装玻璃管。

  ④将上述三部分按相应位置组装成一个整体。

  ⑤安装其他附属结构。

  (2)凝胶色谱柱的装填

  

(3)样品的加入和洗脱